人凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)ELISA試劑盒

規格：96T/48T

用途：用于檢測血清、血漿、細胞培養上清液等樣本中人凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)濃度。

使用前請仔細閱讀說明書。如果有任何問題，請聯系我們。

具體保質期請見試劑盒外包裝標簽。請在保質期內使用試劑盒。聯系時請提供產品貨號、生產日期（見盒簽），以便我們更高效為您服務。

【試劑盒性能】

物理性能：各液體組分澄清透明、無沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應真空包裝，無破損漏氣。

校準曲線線性：校準品劑量反應曲線相關系數 r 值，大于等于 0.9900。

精密度：批內變異系數 CV%小于 10%；批間變異系數 CV%小于 15%。

回收率：回收率在 85%-115%之間。

敏感性：本試劑盒識別人凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)，與結構類似物無交叉。

穩定性：2℃-8℃保存，有效期 6 個月。

【實驗原理】

人凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)ELISA試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中指標表達。用純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可與樣品中指標相結合，經過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）與待測樣品中人凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)的濃度正相關。擬合校準品曲線，可以計算出樣本中人凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)的濃度。

【試劑盒組成】

注意：

1、使用前請檢查試劑盒中試劑的標簽和數量與表格是否一致。

2、試劑盒 2-8℃保存，不得使用過期試劑盒。

3、包被微孔板單次未使用完，要謹記密封放到 2-8℃保存。

4、如果試劑盒的組份需要再次使用，請確保上一次使用之后沒有被污染。

【樣品的準備和保存】

以下只是列出樣品采集和保存的一般指南。所有樣本采集保存過程中， 不得使用疊氮鈉做為防腐劑。樣品如果不立即分析，應分裝后冷凍保存， 且避免反復凍融。

細胞培養上清：離心去除沉淀，立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

血清：用干凈試管收集血液，室溫凝固 30 分鐘，離心 2000×g 20 分鐘，收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

血漿：采用肝素、檸檬酸鹽或 EDTA 抗凝，抽血后 30 分鐘內在2-8℃離心 2000×g 20 分鐘。為消除血小板的影響，建議在 2-8℃進一步離心 10000×g 10 分鐘。立即分析或分后-20℃冷凍保存。

細胞裂解液：對于貼壁細胞，去除培養液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍。加入適量裂解液，用移液器吹打數下，使裂解液和細胞充分接觸。通常 10 秒后，細胞就會被裂解。對于懸浮細胞，離心收集細胞，用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍。加入適量裂解液，用移液器吹打把細胞吹散，用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后，10000—14000×g 離心 3-5 分鐘， 取上清。立即分析或分裝后-20℃ 冷凍保存。

尿液：用無菌管收集，離心 2000×g 20 分鐘。仔細收集上清。如有沉淀形成，應再次離心。

【注意事項】

1、本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷。

2、試驗中請穿著實驗服并戴乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液樣品時，請按國家生物試驗室安全防護條例執行。

3、嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫 20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

4、洗板不正確可能導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

5、消除板底殘留的液體和手指印，否則影響 OD 值。

6、底物顯色液應呈無色或很淺的顏色。

7、避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。

8、在儲存和溫育時避免強光直接照射。

9、平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

10、任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。

11、檢測使用的酶標儀需要安裝能檢測 450±10nm 波長的濾光片，

光密度范圍在 0-3.5 之間。建議使用時提前 15 分鐘預熱。

12、請勿使用其他批號或其他來源的試劑混合或替代本試劑盒中的試劑。

13、試驗中所用的 EP 管和吸頭均為一次性使用，嚴禁混用。

14、請勿使用過期的試劑。

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